質(zhì)控菌株中的培養(yǎng)基性能如何測(cè)試
培養(yǎng)基的用途之前介紹了很多,這次就不做介紹了,今天我們主要討論的是質(zhì)控菌株中的培養(yǎng)基性能測(cè)試方法,因?yàn)檫@方面掌握不了,對(duì)微生物的批量生產(chǎn)是不負(fù)責(zé)任的。不同的培養(yǎng)基的使用用途都是不一樣的,而且根據(jù)不同的使用特點(diǎn),它們的應(yīng)用領(lǐng)域也都不一樣,下面就來(lái)針對(duì)大家所關(guān)心的培養(yǎng)基性能測(cè)試方法做一下深入的介紹,希望對(duì)大家在后期的實(shí)驗(yàn)工作有些幫助。
1 測(cè)試菌株選擇 測(cè)試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基佳性能的一套菌株,應(yīng)來(lái)自/國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株,菌株的選擇參考衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T232-2002《商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程》。
2 定量測(cè)試方法 改良Miles-Misra法 測(cè)試菌株過(guò)夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋?zhuān)粶y(cè)試平板和參照平板劃分為4個(gè)區(qū)域并標(biāo)記;從高稀釋度開(kāi)始,分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對(duì)照平板標(biāo)記好的區(qū)域;將稀釋液涂滿(mǎn)整個(gè)1/4區(qū)域,37°C培養(yǎng)18小時(shí);對(duì)易計(jì)數(shù)的區(qū)域計(jì)數(shù),按公式計(jì)算生長(zhǎng)率(生長(zhǎng)率=待測(cè)培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù))。非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.7,該類(lèi)培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長(zhǎng);選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.1 。
3 半定量測(cè)試方法 改進(jìn)的劃線(xiàn)法接種法 平板分ABCD四區(qū),共劃16條線(xiàn),平行線(xiàn)大概相隔0.5cm,每條有菌落生長(zhǎng)的劃線(xiàn)記作1分,每個(gè)僅一半的線(xiàn)有菌落生長(zhǎng)記作0.5分,沒(méi)有菌落生長(zhǎng)或生長(zhǎng)量少于劃線(xiàn)的一半記作0分,分?jǐn)?shù)加起來(lái)得到生長(zhǎng)指數(shù)G。目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長(zhǎng),而非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)應(yīng)部分或*被抑制,目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G大于6時(shí),培養(yǎng)基可接受 。
4 定性測(cè)試方法 平板接種觀(guān)察法 用接種環(huán)取測(cè)試菌培養(yǎng)物,在測(cè)試培養(yǎng)基表面劃平行直線(xiàn)。按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng),目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng),并有典型的菌落外觀(guān)、大小和形態(tài),非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無(wú)生長(zhǎng)。
以上這些有關(guān)質(zhì)控菌株中的培養(yǎng)基性能測(cè)試方法大家在看的時(shí)候要多認(rèn)真思考一下,而且由于菌株品種比較多,培養(yǎng)基的檢驗(yàn)方法也都不同,具體的方法還是要根據(jù)事實(shí)情況來(lái)做決定。后期我們還會(huì)針對(duì)這方面的知識(shí)做一下深入的探討,有興趣的朋友可以持續(xù)關(guān)注我們的網(wǎng)站,到時(shí)再跟大家做分享,相信在我們的專(zhuān)家?guī)ьI(lǐng)下,大家的微生物知識(shí)理解會(huì)更加容易一些。